4通道32孔實時熒光定量PCR儀的應(yīng)用#2023已更新【TH-Q320】實時熒光定量 PCR 的原理是以熒光共振能量轉(zhuǎn)移原理為基礎(chǔ)。熒光共振能量轉(zhuǎn)移原理是當(dāng)一個熒光分子(供體分子)的熒光光譜與另一個熒光分子(受體分子)的激發(fā)光譜重疊時,供體熒光分子自身的熒光強(qiáng)度衰減,受體熒光分子的熒光強(qiáng)度增強(qiáng).
實時熒光定量PCR系統(tǒng)簡介
實時熒光定量PCR系統(tǒng)主要用于運(yùn)行實時熒光定量PCR實驗,通過熒光激發(fā)和采集的方式,對實驗過程進(jìn)行實時監(jiān)控,將實驗過程數(shù)據(jù)繪制成熒光曲線,實時呈現(xiàn)于儀器顯示界面,并對實驗數(shù)據(jù)進(jìn)行擬合和分析,最后可生成PDF格式的實驗報告。
對取于其他動物體內(nèi)的生物樣本(如血液,體液等)中包含的目標(biāo)核酸,進(jìn)行快速精準(zhǔn)的定性和定量分析,同時也能夠?qū)μ厥鈽颖具M(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)曲線,熔解曲線,基因分型等分析。
基本原理
實時熒光定量PCR儀器的原理:聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(polymerase chain reaction,PCR)是一種用于放大擴(kuò)增特定的DNA片段的分子生物學(xué)技術(shù),它可看作是生物體外的特殊DNA擴(kuò)增,由高溫變性、低溫退火及適溫延伸等幾步反應(yīng)組成一個溫度循環(huán)周期,使目的基因得以迅速擴(kuò)增,具有特異性強(qiáng)、靈敏度高、操作簡便、省時等特點(diǎn),是基因擴(kuò)增技術(shù)的一次重大革新。PCR技術(shù)可將極微量的目標(biāo)DNA特異地擴(kuò)增上百萬倍,從而大大提高對DNA分子的分析和檢測能力。
實時熒光定量PCR技術(shù)是在常規(guī)PCR基礎(chǔ)上加入相應(yīng)的熒光染料或熒光標(biāo)記探針,在PCR反應(yīng)過程中通過熒光信號變化,對整個PCR進(jìn)程進(jìn)行實時檢測,以熒光化學(xué)物質(zhì)監(jiān)測每次聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)循環(huán)后產(chǎn)物總量的方法,通過內(nèi)參或外參的方法對待測樣品中的特定DNA序列進(jìn)行定量分析的方法。
實時熒光定量PCR系統(tǒng)應(yīng)用領(lǐng)域
◆食源性致病菌檢測
◆動植物源性檢測
◆植物科學(xué)與農(nóng)業(yè)生物技術(shù)
◆基因突變及多態(tài)性
◆基礎(chǔ)科學(xué)研究
◆水體監(jiān)測
◆病原核酸檢測
◆ 轉(zhuǎn)基因檢測
◆動物疫情監(jiān)測
◆食品衛(wèi)生檢疫
◆海關(guān)進(jìn)出口檢疫
儀器基本結(jié)構(gòu)
實時熒光定量PCR系統(tǒng)是實時檢測反應(yīng)的儀器,主要由基因擴(kuò)增熱循環(huán)系統(tǒng)、熒光實時檢測系統(tǒng)、微電路控制系統(tǒng)、計算機(jī)及應(yīng)用軟件組成。其中兩個核心功能模塊:熱循環(huán)系統(tǒng)和熒光實時檢測系統(tǒng)。其中基因擴(kuò)增熱循環(huán)系統(tǒng)工作原理與傳統(tǒng)基因擴(kuò)增儀工作原理基本相同,采用半導(dǎo)體加熱制冷工作方式完成熱循環(huán)過程。熒光檢測系統(tǒng)主要有由熒光激發(fā)部件、光信號傳輸部件、熒光檢測部件、控制系統(tǒng)組成。
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